Osuna está bien conectada por carretera y ferrocarril, lo que facilita su acceso tanto desde Sevilla como desde otras ciudades importantes de Andalucía. La ciudad se encuentra en la autovía A-92, que une Sevilla con Málaga, lo que la convierte en un punto estratégico para aquellos que viajan entre estas dos ciudades. Además, la estación de tren de Osuna cuenta con servicios regulares que la conectan con Sevilla, Córdoba y otras ciudades cercanas.
Dentro de Osuna, el transporte público es limitado, pero la ciudad es lo suficientemente compacta como para ser explorada a pie. La mayoría de sus atracciones turísticas, como la Colegiata y la Universidad, están ubicadas en el centro histórico, lo que facilita los desplazamientos entre ellas. Para quienes necesiten transporte, hay taxis y servicios de alquiler de coches disponibles.
La cercanía del aeropuerto internacional de Sevilla, a poco más de una hora en coche, hace que Osuna sea accesible para visitantes internacionales, lo que aumenta su atractivo como destino para eventos y turismo.