La Puebla del Río está bien conectada con la ciudad de Sevilla, lo que facilita el acceso desde distintas partes de España y el extranjero. El aeropuerto más cercano es el de Sevilla (Aeropuerto de San Pablo), ubicado a unos 30 kilómetros del pueblo, con vuelos nacionales e internacionales. Desde Sevilla, se puede llegar a La Puebla del Río en autobús o en coche en aproximadamente 30 minutos.
Dentro del pueblo, se puede recorrer fácilmente a pie debido a su pequeño tamaño. Para quienes deseen explorar los alrededores, como el Parque Nacional de Doñana, hay taxis locales y opciones de alquiler de coches. La infraestructura de carreteras es adecuada y permite un acceso fácil a las atracciones cercanas.
La cercanía a Sevilla, junto con el encanto rural de La Puebla del Río, lo convierten en un destino accesible tanto para turistas como para organizadores de eventos.