Alcalá del Río est facilement accessible depuis Séville, à environ 25 minutes en voiture, via la route A-8006. Elle est également reliée par un réseau de bus interurbains régulier, qui connecte la commune à la gare de Santa Justa à Séville, aux autres villes de la province et à l’aéroport international.
La ville ne dispose pas de gare ferroviaire, mais sa proximité avec les axes ferroviaires majeurs de Séville compense largement. Des services de taxi et de transport à la demande sont également disponibles pour les visiteurs.
La mobilité dans la ville est aisée : centre-ville compact, stationnements disponibles, pistes cyclables en expansion, et espaces piétons permettent de découvrir les quartiers historiques et le bord du fleuve à pied ou à vélo.